真皮には、Ⅰ型コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸などの細胞外マトリックスとよばれる成分が存在し、これら成分により肌のハリや弾力、みずみずしさが保たれ、シワができにくい肌状態が維持されている。細胞外マトリックス成分は線維芽細胞によって合成される一方、線維芽細胞が産生する酵素によって分解もされる。こうした細胞外マトリックスの各成分の合成と分解のバランスが崩れて、分解酵素の活性化が、皮膚のシワやたるみの原因の一つとして考えられている。
本試験では、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液が、細胞外マトリックスの分解を抑制することで、肌のハリや弾力、みずみずしさの維持に寄与し、その結果としてシワの形成を抑制しうる可能性が示唆された。

唇は皮膚に比べて角層が薄い。また、皮脂腺や汗腺を持たないため皮脂膜が形成されず、保湿機能およびバリア機能が低い部位である。その結果、紫外線などの外部刺激の影響を受けやすいことが知られている。本試験では、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液の、口唇由来線維芽細胞におけるUVB照射によるコラーゲン分解抑制作用について評価した。
その結果、本発酵液はUVB照射によって誘導されるコラーゲン分解を有意に抑制した。
以上のことから、本発酵液は紫外線曝露により進行する口唇のコラーゲン減少を抑え、シワ形成を防止する効果が期待できると考えられる。

外的要因により皮膚細胞内に活性酸素が生じ、酸化ストレスが亢進することで、皮膚細胞の機能低下がもたらされる。キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液の抗酸化能を評価するため、DPPHラジカル消去能、一重項酸素消去活性および脂質過酸化抑制作用について検討した。一重項酸素消去活性は、エンドペルオキシドから発生させた一重項酸素を化学発光プローブにより検出することで評価した。脂質過酸化抑制作用は、ロダン鉄法を用い、リノール酸の過酸化度を評価した。その結果、いずれの評価系においても、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液は明らかな抗酸化能が認められた。
以上より、本エキス液は、活性酸素に起因する肌ダメージを抑制することが期待される。

IL-8は、紫外線など外的要因によって分泌が亢進され、真皮中のコラーゲンやエラスチンの分解を促進するだけでなく、表皮幹細胞にもダメージを与える炎症性サイトカインの一つである。本試験では、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液の存在下において、UVB照射により生成が促進されるIL-8の生成抑制作用を評価した。
その結果、UVB照射により表皮角化細胞中のIL-8は増加することが確認され、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液を添加することで、その生成が抑制されることが明らかとなった。
この結果から、本エキス液には抗炎症作用が期待できる。

基底層で分裂した表皮角化細胞は、分化・成熟を経て上層へと移行し、最終的に角層に達した後、脱落することでターンオーバーを繰り返し、表皮を形成している。加齢により表皮角化細胞の新陳代謝が低下すると小ジワや色素沈着、角層における天然保湿因子の発現の低下などが生じる。
表皮角化細胞を用いた細胞増殖試験の結果、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液は、細胞賦活作用があることが認められた。
このことから、本エキス液は、皮膚の新陳代謝機能を回復させることで、小ジワや色素沈着、角層の天然保湿因子の発現の低下などの皮膚の老化症状を改善することが期待できる。

（B）糖化は、生体内にあるコラーゲンなどのタンパク質と食事によって摂取した糖が結びつき、タンパク質が変性して最終的にAGEs（終末糖化産物）が生じる現象である。糖化が進行すると肌では弾力が失われたり、透明感が低下することが知られている。本試験では、抗糖化作用を評価するためにアルブミン-グルコース混合液にキサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液を添加することで糖化反応をどの程度抑えられるか、蛍光性AGEsの蛍光強度を測定し評価した。
その結果、本エキス液は、濃度依存的にAGEsの生成が抑えられることが示されたことから、抗糖化作用による肌のアンチエイジングやくすみ防止に期待できる。

美白作用を評価するためにマッシュルーム由来チロシナーゼを用いてチロシナーゼ阻害作用について調べた。ドーパを基質としてチロシナーゼを作用させ、生成するメラニンの中間体であるドーパクロムの赤色を475nmにて吸光度を測定した。
その結果、キサントフィロミセス／オリーブ果実油発酵溶解質エキス液は濃度依存的にチロシナーゼを阻害することが確認されたことから、シミ予防効果が期待される。

肌バリア機能の指標として、Tewameter®TM300を用いて経皮水分蒸散量（TEWL）の評価を行った。各試験品の塗布前および塗布４週間後に、左頬部で測定を実施した。
その結果、４週間後のTEWLは塗布前と比較して低下傾向を示した。
これらの結果より、発酵プロビタミンオイルを配合した化粧品により、肌バリア機能の向上が期待される。

肌弾力の評価には、Cutometer®MPA580を使用した。各試験品の塗布前および塗布４週間後に、左頬部で測定を実施した。
その結果、弾力性の指標であるR0は有意に低下し、R5は有意に増加した。R0の低下は皮膚の「ハリの向上」を示し、R5の増加は「即時弾力性の向上」を示す。
これらの結果より、発酵プロビタミンオイル配合化粧品は、肌のたるみ改善、引き締め効果、ハリ・弾力の向上に寄与することが期待される。

R0：

Uf（肌の伸び率）

R5：

Ur/Ue（正味弾力）

塗布前と塗布４週間後の顔画像解析にはVISIAを使用し、肌状態の詳細な観察にはドライスキンマイクロスコープMC-50Tを用いた。さらに、肌の明度および黄ぐすみについては、VISIAで取得した顔画像をもとに付属のLab*解析ソフトを用いて評価した。
解析の結果、塗布前と比較してシワおよびキメの項目で有意な低下が認められた。キメの改善については、マイクロスコープによる肌表面観察でも同様の傾向が確認された。また、肌の明度（L*値）は有意に上昇し、肌の黄ぐすみ（b*値）は有意に低下した。
これらの結果より、発酵プロビタミンオイルを配合した化粧品は、シワ・キメを改善して滑らかな肌へ導くとともに、カルボニル化タンパク質の抑制により肌の明るさや透明感を向上させる効果が期待される。